关于“老板助理在离职单上签字是否可以”的问题，这主要取决于公司的具体离职流程和规定，以及老板助理在公司中的角色和权限。
首先，我们需要明确的是，离职单通常需要由具有相应权限的人员进行审批和签字，以确保离职流程的合法性和有效性。在大多数情况下，这会是员工的直接上级、人力资源部门负责人或者公司的高层管理人员。
对于老板助理这一角色，其具体权限和职责可能因公司而异。如果老板助理在公司中被授权处理人事相关事务，包括离职审批，那么他们在离职单上签字可能是有效的。然而，如果老板助理并没有这样的授权，或者公司的离职流程明确规定需要由其他特定人员签字，那么老板助理的签字可能就不具备法律效力。
为了确保离职流程的顺利进行，我建议您：
查阅公司规定：首先，查阅公司的员工手册或者相关的人事政策，了解离职流程的具体规定，包括谁有权在离职单上签字。
与人力资源部门沟通：如果您对公司的离职流程或者老板助理的权限有疑问，可以直接与人力资源部门进行沟通，以获取最准确的信息。
遵循正规流程：无论谁在离职单上签字，都应确保遵循公司规定的离职流程，包括提前通知、工作交接、物品归还等步骤，以避免给公司带来不必要的麻烦。
总的来说，老板助理是否可以在离职单上签字，取决于公司的具体规定和老板助理的权限。为了确保离职流程的合法性和有效性，建议您遵循公司的正规流程，并与相关部门进行沟通确认。