一天只有一次打卡记录，能否申请加班费需分情况讨论，具体如下：
若能证明实际加班事实：
- 即使只有一次打卡记录，只要能通过其他证据（如工作邮件、聊天记录、工作成果提交记录、同事证言、监控录像等）证明您在正常工作时间之外确实进行了工作，且该工作是用人单位安排的或与工作相关，那么您仍然有权申请加班费。
- 打卡记录只是证明加班的一种证据形式，并非唯一证据。法律上更看重的是实际加班的事实，而非单一的打卡记录。
若无法证明实际加班事实：
- 如果仅有一次打卡记录，且没有其他任何证据能够证明您在正常工作时间之外进行了工作，那么用人单位可能会以缺乏证据为由拒绝支付加班费。
- 在这种情况下，您可能需要承担举证不能的不利后果，即无法获得加班费。
建议：
- 为了更好地维护自己的权益，建议您在加班时尽量保留多种证据，如工作邮件、聊天记录、工作成果提交记录等，以便在申请加班费时能够提供充分的证明。
- 如果用人单位拒绝支付加班费，您可以先与用人单位进行协商，协商无果的，可以向劳动监察部门投诉或申请劳动仲裁，以维护自己的合法权益。
额外提醒：
- 加班费的计算通常基于您的基本工资和加班时长，具体计算方法可能因地区和用人单位而有所不同。
- 在申请加班费时，请确保您了解并遵守相关的法律法规和用人单位的规章制度，以免因违反规定而影响您的权益。
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