针对您提出的问题“在厂里申请了一次离职申请上级已经签字了，还能申请第二回吗”，这主要涉及到劳动合同解除的法律规定以及实际操作中的灵活性。以下是我为您提供的详细解答：

首先，我们需要明确的是，根据《中华人民共和国劳动合同法》第三十七条的规定，劳动者有权提前三十日（或在试用期内提前三日）以书面形式通知用人单位解除劳动合同。这种解除权属于劳动者的形成权，即一旦解除的意思表示到达对方，即发生法律效力，无需用人单位的同意。

现在，结合您的情况来分析：

1. 第一次离职申请：

   • 您已经填写了离职申请表，并且上级已经签字同意。
   • 这意味着您的离职意思表示已经到达了用人单位，按照法律规定，此时已经产生了法律效力。

2. 能否申请第二次离职：

   • 从法律层面讲，您当然有权再次提出离职申请，因为这是您的法定权利。
   • 但是，关键在于第一次离职申请的法律效力。由于第一次离职申请已经产生了法律效力，用人单位可能会基于这一申请来安排后续的工作交接和人员调整。
   • 如果您在第一次离职申请未生效前（即三十日期限未满前）想要撤销或更改离职申请，这在实际操作中可能会遇到一些困难。因为一旦离职意思表示到达用人单位，用人单位可能会开始着手准备离职手续，此时撤销或更改可能会给用人单位带来不必要的麻烦和损失。

3. 实际操作建议：

   • 如果您确实想要再次提出离职，或者对第一次的离职申请有反悔之意，建议您首先与用人单位进行充分沟通，说明您的具体情况和想法。
   • 尝试与用人单位协商，看是否能够达成一致意见，比如延迟离职时间、更改离职原因等。
   • 如果用人单位同意您的更改或撤销申请，那么您可以按照新的协议来执行；如果用人单位不同意，那么您可能需要尊重第一次离职申请的法律效力，并按照原计划进行离职。

4. 注意事项：

   • 在任何情况下，都建议您保持与用人单位的良好沟通，避免因为离职问题而产生不必要的纠纷和矛盾。
   • 同时，也请您注意保护自己的合法权益，确保在离职过程中不会受到不公平的待遇或损失。

综上所述，虽然您有权再次提出离职申请，但考虑到第一次离职申请的法律效力和实际操作中的灵活性，我建议您先与用人单位进行充分沟通并协商解决方案。