在交通事故责任纠纷案件中，应当起诉保险单上载明的保险人（即保险公司），且需确保起诉的保险公司与保险单上盖章的保险公司为同一主体。以下是具体分析：

1. 保险单的法律效力
   保险单是保险合同成立的书面证明，具有法律效力。根据《保险法》第十三条，保险单或其他保险凭证应当载明当事人双方约定的合同内容。因此，保险单上载明的保险人（即保险公司名称）是合同相对方，也是诉讼中的适格被告。

2. 盖章的保险公司的意义
   保险单上的盖章是保险公司确认合同内容并承担保险责任的凭证。若保险单上盖章的保险公司与载明的保险人名称一致，则直接起诉该保险公司即可。若存在名称不一致（如分公司盖章但保险单载明总公司），需根据具体关系确定被告：

   • 若分公司以自己名义签发保险单并盖章，且具有独立诉讼主体资格（如领取营业执照的分公司），可起诉该分公司；
   • 若保险单载明总公司但由分公司盖章，通常需将总公司和分公司列为共同被告，或根据法院指引选择主体。

3. 实务建议

   • 核对保险单信息：起诉前仔细核对保险单上的保险公司名称、统一社会信用代码、盖章单位等信息，确保被告准确无误；
   • 调取工商档案：若对保险公司主体资格存疑，可向市场监管部门调取其工商登记信息，确认分公司与总公司的关系；
   • 追加被告：若发现保险单载明主体与盖章主体不一致，可在起诉时申请追加被告，避免因主体错误导致诉讼程序延误。

总结：交通事故责任纠纷中，应以保险单载明的保险人为被告，同时确保该主体与盖章单位一致。若存在不一致，需根据分公司与总公司的法律关系确定诉讼策略。如有具体案件细节需要进一步分析，可直接向我咨询。