一般情况下，一审未申请笔迹鉴定，二审不能申请。根据《最高人民法院关于民事诉讼证据的若干规定》，当事人申请鉴定，应当在人民法院指定期间内提出，并预交鉴定费用。逾期不提出申请或者不预交鉴定费用的，视为放弃申请。对需要鉴定的待证事实负有举证责任的当事人，在人民法院指定期间内无正当理由不提出鉴定申请或者不预交鉴定费用，或者拒不提供相关材料，致使待证事实无法查明的，应当承担举证不能的法律后果。
不过，也有例外情况。如果一审时提出了笔迹鉴定申请，但法院没有同意，有此类正当理由，二审可以申请笔迹鉴定。或者，如果鉴定存在以下情形，二审也可以重新申请笔迹鉴定：
因此，能否在二审中申请笔迹鉴定，取决于一审时的情况以及二审法院的具体判断。如果你对此有疑问或需要进一步的法律帮助，请直接向我咨询。