二审时是否可以申请笔迹鉴定，需根据具体情况判断，包括是否存在新证据、新理由、一审放弃鉴定的正当理由以及二审法院对鉴定必要性的评估。以下是对此问题的详细分析：
可以申请的情况
存在新证据或新理由：
- 若当事人在一审结束后发现新的证据，这些证据能够显著影响笔迹真实性的判断，或者有新的理由表明一审时放弃鉴定存在合理的客观原因（如一审时无法获取关键比对样本，而二审时该样本已可获得），则二审时可能可以申请笔迹鉴定。
- 法律依据：虽然具体法条未直接提及，但基于诉讼公正和查明事实的原则，法院通常会考虑允许在新证据或新理由出现的情况下重新申请鉴定。
一审放弃鉴定存在正当理由：
- 若当事人在一审时因不可抗力（如突发重大疾病、自然灾害等）未能及时申请笔迹鉴定，或受到对方当事人、第三人的欺诈、胁迫等原因导致未能申请鉴定，且在二审时能够提供充分证据证明这些正当理由，则二审法院可能会准许再次申请鉴定。
- 法律依据：同样基于诉讼公正原则，法院在确认存在正当理由后，可能会准许再次申请鉴定。
不可以申请的情况
无正当理由放弃后不得再申请：
- 根据《最高人民法院关于民事诉讼证据的若干规定》的相关条款，当事人在人民法院指定期间内无正当理由不提出鉴定申请，或者拒不提供相关材料，致使待证事实无法查明的，应当承担举证不能的法律后果。
- 如果当事人在一审中明确表示放弃笔迹鉴定，且不存在上述正当理由，二审法院通常不会允许其再次申请鉴定。这是为了维护诉讼程序的稳定性和严肃性，防止当事人滥用诉讼权利。
二审法院认为无鉴定必要：
- 即使存在新证据或新理由，如果二审法院经过审查认为笔迹鉴定对于案件事实的查明并无实质性帮助，或者已经通过其他方式能够确认笔迹的真实性，那么也可能不会准许鉴定申请。
操作建议
- 在决定是否申请二审笔迹鉴定前，当事人应充分考虑是否存在新证据、新理由或一审放弃鉴定的正当理由。
- 同时，建议咨询二审承办法官或合议庭的意见，了解法院对鉴定必要性的看法，以做出更为明智的决策。
- 若决定申请鉴定，应尽早准备相关材料和证据，以确保申请的顺利提交和审理。
总结：二审时是否可以申请笔迹鉴定，需根据具体情况判断。当事人应充分了解相关法律法规和诉讼程序，结合案件实际情况，做出最为合适的决策。如有任何疑问或需要进一步的法律帮助，请直接向我咨询。