在二审中申请笔迹鉴定，需满足以下条件：

1. 一审未申请且存在合理理由
   若一审中未提出笔迹鉴定申请，二审中需说明未申请的合理原因（如新发现的证据、一审未意识到鉴定必要性等）。若一审已申请但被驳回，需审查驳回理由是否成立，若因程序瑕疵或新证据出现，二审可重新申请。

2. 鉴定事项与案件争议焦点直接相关
   申请鉴定的笔迹必须涉及案件关键事实（如合同签名真实性、遗嘱笔迹真伪等）。若鉴定结果不影响案件核心争议（如笔迹真伪与案件结果无必然联系），法院可能不予准许。

3. 存在鉴定可行性
   需提供符合鉴定条件的检材（如原件、清晰可辨的笔迹样本）和比对样本（如当事人同期书写的其他笔迹）。若检材模糊、缺失或比对样本不足，鉴定机构可能无法出具结论，法院会驳回申请。

4. 符合法定程序要求

   • 申请时间：需在二审举证期限内提出（特殊情况可申请延期）。
     
   • 书面申请：提交书面鉴定申请书，明确鉴定目的、检材来源及比对样本。
     
   • 预交费用：按法院要求预交鉴定费用（最终由责任方承担）。
     

5. 无其他证据足以认定事实
   若其他证据（如证人证言、录音录像）已能证明笔迹真伪，法院可能认为鉴定无必要。申请方需说明鉴定是“必要且唯一”的证明手段。

实务建议：

• 提前与鉴定机构沟通检材可行性，避免因技术原因被驳回。
  
• 若对方对鉴定申请有异议，需准备反驳意见（如检材真实性、样本关联性等）。
  
• 二审法院对鉴定申请审查更严格，建议结合新证据或一审程序瑕疵强化申请理由。
  

如有具体案件细节，可进一步向我说明，我会结合案情分析申请策略。