在分居期间，如果丈夫未支付抚养费，您可以通过以下方式收集证据，并确保这些证据在起诉时具有法律效力：
一、书面材料证据
聊天记录留存：
- 通过微信、短信、电子邮件等通信方式，如果双方曾就抚养费问题进行过协商，并且对方有承诺支付但未履行的记录，这些聊天记录都是非常重要的证据。
- 确保将这些记录截图或保存为文件，并注明日期和时间，以便在法庭上展示。
书面协议：
- 如果双方曾签订过分居协议或关于抚养费支付的书面约定，这些文件具有极强的证明力。
- 请妥善保管这些协议的原件，并准备复印件以备法庭使用。
二、证人证言
- 寻找了解分居情况及抚养费支付情况的邻居、朋友或家人作为证人。
- 证人需要能够出庭作证，说明对方在分居期间未支付抚养费的事实。
- 提前与证人沟通，确保他们了解并愿意在必要时提供证言。
三、视听资料证据
- 在与对方就抚养费问题进行沟通时，可以录音或录像。
- 这些视听资料能够直观反映对方未支付抚养费的事实。
- 确保录音或录像是在合法合规的前提下进行的，不侵犯对方的合法权益。
四、相关票据佐证
- 保留自己为抚养孩子支出的各项费用票据，如生活开销、教育费用、医疗费用等。
- 这些票据能够从侧面佐证对方未支付抚养费，显示出抚养孩子的实际经济支出。
- 整理好这些票据，并注明每笔费用的用途和金额。
注意事项
- 合法性：确保所有收集的证据都是合法的，不侵犯他人的合法权益。
- 真实性：证据必须真实可靠，能够客观反映事实情况。
- 关联性：证据应与抚养费支付问题直接相关，能够证明对方未履行支付义务。
在收集完证据后，您可以咨询专业律师，了解具体的起诉流程和法律要求。律师将帮助您整理证据，撰写起诉状，并代表您在法庭上维护您的合法权益。记住，及时采取行动，保护自己和孩子的权益是非常重要的。