结论：谅解书已签但检察院约谈时被害人家属不愿意配合，这确实可能给案件处理带来一定复杂性，但并不意味着案件无法继续推进或必然产生不利后果。以下从多个角度为你详细分析并给出建议。
一、谅解书的法律意义与现状
谅解书在刑事案件中通常被视为被害人或其家属对犯罪嫌疑人或被告人的一种谅解表示，它可以在一定程度上影响量刑，尤其是在涉及故意伤害、交通肇事等案件中。然而，谅解书并非案件处理的唯一或决定性因素，其法律效力主要体现在量刑环节，而非定罪环节。
现状分析：既然谅解书已经签署，说明在某个时间点，被害人家属是愿意给予谅解的。但现在检察院约谈时他们不愿意配合，可能出于多种原因，如情绪变化、对案件处理结果的不满、受到外界影响等。
二、检察院约谈的目的与被害人家属的态度
检察院约谈被害人家属，通常是为了进一步了解案件情况，核实证据，或者就量刑等问题听取意见。被害人家属的态度虽然重要，但并非决定性因素。
如果被害人家属只是暂时不愿意配合：
- 你可以尝试与被害人家属沟通，了解他们不愿意配合的具体原因，并寻求解决方案。
- 如果沟通无果，你可以向检察院说明情况，请求检察院给予一定的时间和空间，以便你继续做被害人家属的工作。
如果被害人家属明确表示不再愿意给予谅解：
- 这并不意味着案件必然产生不利后果。检察院在量刑时会综合考虑多种因素，包括犯罪的性质、情节、社会危害程度、被告人的认罪态度、悔罪表现等。
- 你可以积极准备辩护材料，突出被告人的认罪态度、悔罪表现以及其他有利于量刑的情节，以争取更轻的量刑。
三、可能的法律后果与应对策略
量刑方面：
- 谅解书的缺失可能会在一定程度上影响量刑，但并非决定性因素。如果被告人有其他有利于量刑的情节，如自首、立功、认罪认罚等，仍然有可能获得较轻的量刑。
- 你可以在辩护中强调这些情节，并请求检察院在量刑时予以充分考虑。
案件处理方面：
- 检察院在约谈被害人家属后，会根据案件情况和相关法律规定，作出是否起诉、如何起诉等决定。
- 你可以密切关注案件进展，及时与检察院沟通，了解案件处理情况，并根据需要调整辩护策略。
四、建议与注意事项
保持沟通：
- 与被害人家属保持沟通，了解他们的想法和需求，尽量化解矛盾，争取他们的理解和支持。
- 与检察院保持密切联系，及时了解案件进展和约谈情况，以便及时调整辩护策略。
准备充分：
- 积极准备辩护材料，包括被告人的认罪态度、悔罪表现、社会危害程度等方面的证据和材料。
- 针对被害人家属不愿意配合的情况，准备相应的应对策略和辩护意见。
寻求专业帮助：
- 如果你在处理案件过程中遇到困难或疑问，可以及时向我咨询，我会根据你的具体情况和案件进展，为你提供专业的法律意见和帮助。
最后，每个案件都有其独特性和复杂性，以上分析仅供参考。如果你有任何具体的法律问题或需要进一步的帮助，请直接向我咨询。