在三方对质的情况下，劳动局（现在一般称为人力资源和社会保障局或劳动保障监察部门）是有可能确定用工主体的，但具体能否确定以及如何确定，需结合实际情况和证据来判断。以下从几个角度详细分析：
一、劳动局确定用工主体的法律依据
劳动局在处理劳动纠纷时，主要依据的是《中华人民共和国劳动法》、《中华人民共和国劳动合同法》以及相关的劳动保障法律法规。这些法律法规明确了用人单位与劳动者之间的权利义务关系，也为劳动局确定用工主体提供了法律依据。当存在三方对质，即劳动者、疑似用人单位和另一方（可能是实际用工者、承包方等）就用工关系存在争议时，劳动局有权进行调查，并根据调查结果确定真正的用工主体。
二、劳动局确定用工主体的过程
调查取证：劳动局会首先进行调查取证，包括询问三方当事人、查阅相关证据材料（如劳动合同、工资支付记录、工作证等）以及实地考察等。
分析证据：在收集到足够证据后，劳动局会分析这些证据，以确定哪一方是真正的用工主体。这通常涉及对劳动合同的签订情况、工资支付情况、工作安排和管理等方面的综合考量。
作出认定：基于调查和分析结果，劳动局会作出用工主体的认定。如果认定存在争议或证据不足，劳动局可能会要求三方进一步提供证据或进行补充调查。
三、三方对质对确定用工主体的影响
在三方对质的情况下，各方的陈述和证据将成为劳动局确定用工主体的关键。如果三方都能提供充分、有力的证据来支持自己的主张，那么劳动局在认定时将会更加谨慎和全面。反之，如果某一方无法提供有效证据或证据存在矛盾，那么其主张可能不会被劳动局采纳。
四、特殊情况下的处理
存在多重劳动关系：在某些情况下，劳动者可能同时与多个用人单位存在劳动关系（如非全日制用工、兼职等）。此时，劳动局需要仔细分析各方的用工关系和证据，以确定每个用人单位在劳动关系中的地位和责任。
存在违法用工行为：如果三方中存在违法用工行为（如未签订劳动合同、未支付工资等），劳动局在确定用工主体的同时，还会依法对违法用工行为进行处罚。
五、法律建议
保留证据：对于劳动者而言，保留与用工关系相关的所有证据（如劳动合同、工资支付记录、工作证等）至关重要。这些证据将在三方对质时发挥关键作用。
积极配合调查：在劳动局进行调查时，各方应积极配合并提供真实、准确的陈述和证据。这有助于劳动局更快、更准确地确定用工主体。
寻求法律帮助：如果三方对质过程中存在争议或无法达成一致意见，建议寻求专业律师的法律帮助。律师可以提供专业的法律意见和协助处理相关纠纷。
总结来说，劳动局在三方对质的情况下是有可能确定用工主体的，但具体能否确定以及如何确定需结合实际情况和证据来判断。如果你在这方面遇到问题或有任何疑问，可以直接向我咨询。