在起诉分居期间内的抚养费开庭时，您需要清晰、有条理地陈述自己的诉求和理由，同时注意一些关键的法律要点和庭审技巧。以下是一些详细的建议：
一、明确诉求和理由
诉求明确：
- 明确要求对方支付分居期间未履行的抚养费，具体金额需根据子女的实际需要和对方的支付能力来确定。
- 可以提出要求对方按照一定比例或固定金额支付抚养费，并说明该金额的计算依据。
理由充分：
- 引用《最高人民法院关于适用〈中华人民共和国民法典〉婚姻家庭编的解释(一)》第四十三条的规定，说明在婚姻关系存续期间，父母双方或一方拒不履行抚养子女义务时，未成年子女或不能独立生活的成年子女有权请求支付抚养费。
- 强调对方在分居期间未履行抚养义务，导致子女生活受到严重影响，需要法院支持抚养费的支付。
二、准备证据材料
分居证明：
- 提供分居协议、租房合同、居住证明等材料，证明双方已分居且分居期间对方未履行抚养义务。
子女需要证明：
- 提供子女的学费、医疗费、生活费等支出凭证，证明子女在分居期间的实际需要。
- 可以提供子女的成长记录、教育需求等材料，进一步说明抚养费的重要性。
对方支付能力证明：
- 提供对方的收入证明、财产状况等材料，证明对方有支付抚养费的能力。
三、注意庭审技巧
保持冷静和理性：
- 在庭审过程中，保持冷静和理性，避免情绪化表达。
- 清晰、有条理地陈述自己的诉求和理由，不要打断对方或法官的发言。
积极回应法官询问：
- 对于法官的询问，要积极、准确地回应，不要回避或模糊回答。
- 如果对某个问题不清楚或不确定，可以请求法官给予一定时间进行准备或说明。
尊重对方和法庭：
- 尊重对方和法庭，不要使用侮辱性或攻击性的语言。
- 对于对方的陈述和证据，要认真倾听并考虑其合理性，不要盲目否定或忽视。
四、了解法律要点
抚养费请求权的主体：
- 抚养费请求权的主体是未成年子女或不能独立生活的成年子女，而不是父母一方。
“拒不履行抚养子女义务”的判断标准：
- 需要结合具体案情判断对方是否有履行条件和履行能力而不履行，主观上是否存在可追责性。
诉讼费用的收取：
- 抚养费纠纷案件属于非财产性案件，诉讼费用按照“每件交纳50元至100元”标准收取。但如果子女抚养以及抚养费给付问题在离婚纠纷案件中一并处理，则按照“离婚案件”确定诉讼费用。
五、后续跟进
关注判决结果：
- 庭审结束后，关注法院的判决结果。如果对判决结果不满意，可以在法定期限内提出上诉。
执行判决：
- 如果判决对方支付抚养费，但对方未履行判决义务，可以向法院申请强制执行。
持续关注子女情况：
- 无论判决结果如何，都要持续关注子女的情况，确保子女得到适当的抚养和照顾。如果需要，可以再次向法院提起诉讼或申请变更抚养费金额。
希望以上建议能对您有所帮助。在庭审过程中，请务必保持冷静和理性，依法维护自己和子女的合法权益。