结论：分居四年二次起诉离婚调和后再次起诉离婚，并不会直接导致放弃这四年的抚养费。抚养费的支付与离婚诉讼的调解或判决结果无直接关联，而是基于父母对子女的法定抚养义务。
分析说明：
抚养费的法定性：
- 根据《中华人民共和国民法典》的相关规定，父母对子女有法定的抚养义务，这一义务不因父母婚姻关系的存续或解除而免除。
- 抚养费是父母为子女提供生活、教育、医疗等必要费用的一种方式，其支付是法定的，与离婚诉讼的调解或判决结果无直接联系。
离婚诉讼与抚养费的关系：
- 离婚诉讼主要解决的是夫妻双方婚姻关系的解除、财产分割、子女抚养权归属等问题。
- 抚养费支付问题通常会在离婚诉讼中一并处理，但即使离婚诉讼中未明确提及抚养费，父母对子女的抚养义务仍然存在，子女仍有权要求父母支付抚养费。
分居期间抚养费的支付：
- 分居期间，父母双方虽然不再共同生活，但对子女的抚养义务并未因此免除。
- 如果分居期间一方未支付抚养费，子女或另一方父母有权在离婚诉讼中或离婚后要求支付分居期间的抚养费。
再次起诉离婚与抚养费：
- 再次起诉离婚并不意味着自动放弃之前未支付的抚养费。
- 无论离婚诉讼的调解或判决结果如何，父母对子女的抚养义务始终存在，子女或另一方父母仍有权要求支付之前未支付的抚养费。
特殊场景：
- 如果在离婚诉讼中，双方就抚养费支付问题达成了协议，并且该协议被法院确认，那么双方应按照协议履行。但这并不影响子女在必要时（如协议未履行或情况发生变化）要求增加或变更抚养费的权利。
行动建议：
- 如果您是要求支付抚养费的一方，建议在离婚诉讼中明确提出抚养费支付请求，并提供相关证据（如子女的生活费用、教育费用等）以支持您的主张。
- 如果您是可能支付抚养费的一方，应了解自己的法定抚养义务，并积极与对方协商抚养费支付问题，以避免不必要的法律纠纷。
- 如果在分居期间或离婚后，对方未支付抚养费，您可以向法院提起诉讼或申请强制执行，以维护子女的合法权益。
法律依据：
- 《中华人民共和国民法典》第一千零六十七条：父母不履行抚养义务的，未成年子女或者不能独立生活的成年子女，有要求父母给付抚养费的权利。
- 《中华人民共和国民法典》第一千零八十五条：离婚后，子女由一方直接抚养的，另一方应当负担部分或者全部抚养费。负担费用的多少和期限的长短，由双方协议；协议不成的，由人民法院判决。