结论：针对员工离职后在抖音直播间恶意诋毁您的情况，您可以采取以下措施来维护自己的合法权益：首先，收集并固定相关证据；其次，尝试与对方沟通协商，要求其停止侵权行为并公开道歉；若协商无果，您可以考虑向抖音平台投诉或直接向法院提起诉讼。

详细分析：

1. 收集并固定证据：

   • 证据类型：您需要收集员工在抖音直播间恶意诋毁您的相关证据，包括但不限于直播视频、截图、评论记录等。这些证据应能够清晰地展示员工的侵权行为及其对您造成的负面影响。
   • 固定证据：为了确保证据的完整性和真实性，建议您及时对直播视频进行录屏或截图保存，并记录下直播的时间、链接等信息。同时，也可以考虑对相关评论进行截图保存，以证明侵权行为的广泛传播和对您造成的实际损害。

2. 与对方沟通协商：

   • 协商目的：在收集到足够证据后，您可以尝试与员工进行沟通协商，要求其停止侵权行为并公开道歉。这有助于化解双方矛盾，避免事态进一步恶化。
   • 协商方式：您可以通过私信、电话或其他方式与员工取得联系，明确表达您的诉求和立场。在协商过程中，保持冷静和理性，避免情绪化交流。

3. 向抖音平台投诉：

   • 投诉依据：如果员工拒绝停止侵权行为或协商无果，您可以向抖音平台投诉其恶意诋毁行为。抖音平台有义务对用户的违规行为进行监管和处理。
   • 投诉流程：您可以通过抖音平台的投诉渠道提交投诉申请，并提供相关证据材料。平台在收到投诉后，会进行调查核实，并根据情况对违规用户采取相应的处罚措施。

4. 向法院提起诉讼：

   • 诉讼依据：如果员工的行为构成对您名誉权的侵害，且您无法通过协商或投诉解决问题，您可以考虑向法院提起诉讼，要求员工承担侵权责任。
   • 诉讼流程：在提起诉讼前，您需要准备好相关证据材料，并撰写起诉状。起诉状应明确阐述您的诉求、事实和理由，并附上相关证据材料。然后，您可以将起诉状提交至有管辖权的人民法院，并按照法院的要求缴纳诉讼费用。在诉讼过程中，您需要积极配合法院的调查和审理工作，以维护自己的合法权益。

额外建议：

• 加强自我保护意识：在未来的经营活动中，建议您加强自我保护意识，避免与员工产生不必要的矛盾和纠纷。同时，也可以考虑在劳动合同或员工手册中明确规定员工不得恶意诋毁公司或其负责人的条款，以约束员工的行为。
• 寻求专业法律帮助：如果您在处理此类纠纷时感到困惑或无助，可以随时向我咨询。作为专业律师，我将根据您的具体情况提供有针对性的法律建议和帮助。