在两轮电动车撞上三轮电动车后面（即追尾事故）的情况下，要认定事故为追尾并明确责任，主要依赖以下几种凭证和证据：
现场勘查记录：
- 交警部门在接到事故报警后，会前往现场进行勘查，并制作现场勘查记录。这份记录会详细描述事故现场的情况，包括车辆的位置、碰撞痕迹、刹车痕迹等，是认定事故责任的重要依据。
车辆碰撞痕迹及损坏情况：
- 两轮电动车与三轮电动车的碰撞痕迹，如刮擦、凹陷、断裂等，以及车辆的损坏情况，可以直观地反映事故的发生过程和碰撞力度。这些痕迹和损坏情况需要由专业人员进行鉴定，并出具鉴定报告。
证人证言：
- 如果有目击者在事故现场，他们的证言对于认定事故责任也至关重要。证人可以描述事故发生的经过、双方车辆的速度、行驶方向等信息，为事故责任的认定提供有力支持。
行车记录仪或监控视频：
- 如果事故现场附近有行车记录仪或监控视频，这些视频资料可以直观地展示事故发生的全过程，包括两轮电动车如何撞上三轮电动车的后面。这些视频资料是认定事故责任的最直接、最有力的证据。
当事人的陈述和申辩：
- 事故双方当事人的陈述和申辩也是认定事故责任的重要参考。虽然当事人的陈述可能存在主观性，但结合其他证据，可以综合判断其真实性。
在收集到上述证据后，交警部门会根据《道路交通安全法》等相关法律法规，对事故责任进行认定。如果认定两轮电动车驾驶员存在追尾行为，且该行为是导致事故发生的主要原因，那么两轮电动车驾驶员将承担主要或全部责任。
如果事故双方对责任认定有异议，可以在收到事故责任认定书后，按照法定程序申请复核或提起诉讼。在处理此类事故时，建议双方保持冷静，积极配合交警部门的调查工作，并妥善保存好相关证据，以便在后续处理中维护自己的合法权益。
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