关于农村宅基地房屋归属协议书兄弟自签未按手印是否生效的问题，结论是：协议书的生效与否并不完全取决于是否按了手印，而是需要综合考量多个因素。以下是我从不同角度为你进行的分析：

1. 协议书的法律效力基础：

   • 协议书，作为一种民事法律行为，其生效的基本条件是双方意思表示真实、一致，且内容不违反法律、行政法规的强制性规定，不违背公序良俗。
   • 在农村宅基地房屋归属的情境中，兄弟之间签订的协议书，如果满足了上述基本条件，那么它本身是具备法律效力的基础。

2. 手印的作用与替代性：

   • 手印，在传统观念中，常被视为确认身份和同意的一种方式。然而，在现代法律体系中，手印并不是协议生效的必备要素。
   • 如果协议书上有双方的签字，且签字是真实、自愿的，那么即使没有按手印，协议书仍然可以生效。签字本身就代表了双方对协议内容的认可和接受。
   • 当然，如果双方都愿意按手印以增加协议的正式性和可信度，那也是完全可以的，但这并不是法律上的强制要求。

3. 可能影响协议生效的其他因素：

   • 协议内容的合法性：如果协议书的内容违反了法律、行政法规的强制性规定，或者违背了公序良俗，那么即使双方都签了字（或按了手印），协议书也是无效的。
   • 双方的真实意思表示：如果协议书是在一方被欺诈、胁迫或者乘人之危的情况下签订的，那么该协议书也是可以被撤销的。
   • 协议书的形式要求：虽然手印不是必备要素，但协议书的形式（如是否书面、是否清晰可辨等）也可能影响其法律效力。一般来说，书面形式的协议书更容易被法院认可和执行。

4. 实际建议：

   • 为了确保协议书的法律效力，建议双方在签订时尽量采用书面形式，并明确、具体地约定房屋归属、使用、收益、处分等事项。
   • 双方签字时，最好使用真实的姓名和清晰的字迹，以避免后续可能出现的争议。
   • 如果条件允许，可以考虑对协议书进行公证或者见证，以增加其正式性和可信度。

总结来说，农村宅基地房屋归属协议书兄弟自签未按手印并不一定导致协议无效。关键在于协议书的内容是否合法、双方的意思表示是否真实一致，以及协议书的形式是否符合法律要求。如果你对协议书的具体内容或者签订过程有任何疑问，可以直接向我咨询，我会为你提供更详细的法律建议。