不服从上夜班安排，用人单位不一定可以直接辞退员工，需视具体情况而定。以下从不同角度进行分析：
一、劳动合同及规章制度的角度
劳动合同约定：
- 如果劳动合同中明确约定了员工需要服从上夜班的工作安排，那么员工拒绝上夜班可能构成违约。但即便如此，用人单位也不能直接辞退员工，而应先与员工协商，或依据劳动合同及公司规章制度进行相应处理，如警告、罚款、调岗等。若员工仍拒绝改正，用人单位在符合法定条件的情况下，方可解除劳动合同。
公司规章制度：
- 公司规章制度中若规定了员工需服从工作安排，包括上夜班，且该规章制度已经过民主程序制定并公示，或已告知员工，那么员工拒绝上夜班可能违反公司规章制度。但同样，用人单位不能直接辞退，而应按照规章制度规定的程序进行处理。
二、法律法规的角度
《劳动合同法》的相关规定：
- 根据《劳动合同法》第三十九条，劳动者严重违反用人单位的规章制度的，用人单位可以解除劳动合同。但这里的“严重违反”需要达到一定的程度，且用人单位需要承担举证责任，证明员工的行为确实构成了严重违反规章制度。
- 如果员工拒绝上夜班的行为并未达到严重违反规章制度的程度，或者用人单位无法证明这一点，那么用人单位直接辞退员工可能构成违法解除劳动合同，需要承担相应的法律责任。
特殊工时制度：
- 如果用人单位实行的是不定时工作制或综合计算工时工作制，且已经过劳动行政部门的批准，那么员工可能需要服从上夜班的工作安排。但即便如此，用人单位也需要确保员工的休息休假权利得到保障，不能随意安排加班或剥夺员工的休息时间。
三、实际操作中的建议
与员工协商：
- 在员工拒绝上夜班时，用人单位应首先与员工进行协商，了解员工拒绝的原因，并尝试寻找解决方案。例如，可以调整员工的工作时间、提供必要的休息设施或补偿等。
依据规章制度处理：
- 如果协商无果，用人单位可以依据公司规章制度进行处理。但需要注意的是，处理程序必须合法合规，且需要保留相关证据以备不时之需。
避免违法解除：
- 用人单位在解除劳动合同时必须谨慎行事，确保解除行为符合法律法规的规定。否则，可能面临支付赔偿金、恢复劳动关系等法律后果。
总结来说，不服从上夜班安排并不直接导致用人单位可以辞退员工。用人单位需要依据劳动合同、公司规章制度以及相关法律法规的规定，通过合法合规的程序进行处理。如果用人单位直接辞退员工且无法证明员工的行为构成严重违反规章制度或符合其他法定解除条件，那么可能构成违法解除劳动合同，需要承担相应的法律责任。如有更多疑问或需要进一步的法律帮助，请直接向我咨询。