结论：高速公路工程合同签订后，是否可以支付居间费不能一概而论，需结合合同约定、居间服务内容完成情况、法律法规规定等多方面因素综合判断。具体分析如下：

1. 合同约定优先
   若工程合同与居间合同中明确约定“合同签订后即支付居间费”，且该约定不违反法律强制性规定（如《民法典》中关于居间合同的规定），则支付行为具有合同依据。但需注意：

   • 约定需明确支付条件（如仅“签订合同”还是需满足其他条件，如合同生效、预付款到账等）；
     
   • 若约定模糊（如“合同签订后适当时候支付”），可能引发纠纷，需结合行业惯例或补充协议确定。

2. 居间服务内容完成情况
   根据《民法典》第九百六十三条，居间人促成合同成立的，委托人应按约定支付报酬。但需满足：

   • 居间人已实际完成促成合同签订的核心义务（如提供信息、协调谈判等）；
     
   • 若合同签订后因居间人原因（如虚假信息）导致合同无效或解除，委托人可能拒绝支付或要求返还居间费。
     示例：若居间人仅介绍双方认识，未参与实质性谈判，委托人可能以“服务未完成”抗辩。

3. 法律法规限制

   • 行业监管：部分地区对工程居间费有特殊规定（如比例上限、支付方式），需核查当地政策；
     
   • 反不正当竞争：若居间费以“回扣”“好处费”形式支付，可能涉嫌商业贿赂，违反《反不正当竞争法》；
     
   • 税务合规：居间费需依法纳税，支付方需履行代扣代缴义务，否则可能面临税务处罚。

4. 实践中的风险点

   • 合同效力风险：若工程合同因主体资格、审批手续等问题被认定无效，居间合同可能随之无效，支付请求可能被驳回；
     
   • 支付条件争议：若合同约定“工程款到账后支付居间费”，则签订合同后未必立即支付；
     
   • 证据留存：居间人需保留促成合同成立的证据（如沟通记录、会议纪要），否则可能承担举证不能后果。

建议：

• 支付前核对居间合同条款，明确支付条件、时间及违约责任；
  
• 确认工程合同已依法成立且无无效情形；
  
• 保留居间服务完成的证据，避免后续纠纷；
  
• 涉及大额支付时，可要求居间人提供合法发票，降低税务风险。
  

如有具体合同条款或纠纷场景，可进一步向我咨询，我会结合细节提供针对性分析。