关于企业询证函回函是否一定要盖公章的问题，这主要取决于具体的函证流程和银行或相关机构的规定。不过，我可以根据一般情况和相关规范来给您一个详细的解答。
首先，从规范银行函证及回函工作的角度来看，银行或相关机构在回函时通常需要加盖公章或有效印章，以确保回函的真实性和权威性。这是因为银行函证是注册会计师独立审计的核心程序之一，银行回函对于注册会计师在审计工作中识别财务报表错误与舞弊行为至关重要。因此，回函的盖章是确保信息准确性和可靠性的重要环节。
具体来说，根据《关于进一步规范银行函证及回函工作的通知》等相关规定，银行在回函时应遵循以下原则：
签章要求：银行原则上应当在被审计单位签署的银行询证函原件上确认、填写相关信息并签章。这通常意味着需要在回函上加盖公章或银行指定的有效印章。
回函内容：银行应对回函信息的真实性和准确性负责，并确保回函内容完整、规范。这包括对询证函列示的全部项目作出回应，并在发现询证函所载信息与银行信息不相符时，在回函上按照要求列明不符事项。
内部控制：银行应建立和完善银行函证回函工作的内部控制，包括明确回函的工作流程、建立相应的授权机制和制衡机制、规范询证函回函用章的管理制度等。这些措施有助于确保回函的盖章过程符合规定，并防止因回函不实导致的运营风险、法律风险和声誉风险。
此外，随着金融业务的创新发展，一些银行已经推出了电子函证业务，通过数字化方式简化流程、提高效率。在电子函证业务中，虽然可能不再涉及传统的公章盖章过程，但银行会通过其他电子认证方式（如数字签名、电子印章等）来确保回函的真实性和权威性。
总结来说，无论是传统的纸质函证还是现代的电子函证，银行或相关机构在回函时都需要采取一定的措施来确保回函的真实性和权威性。在纸质函证中，这通常意味着需要加盖公章或有效印章；而在电子函证中，则可能通过其他电子认证方式来实现。因此，企业询证函回函在大多数情况下是需要盖章的，但具体形式可能因银行或相关机构的规定而有所不同。