原告第三人签字后，一般不能再单独起诉。具体分析如下：

一. 调解协议的法律效力

1. 调解协议的定义：调解协议是双方当事人在自愿、平等的基础上，通过协商达成的解决争议的方案。
2. 法律效力：一旦调解协议达成并签字确认，通常具有法律效力，对双方当事人均具有约束力。
3. 例外情况：除非存在欺诈、胁迫等导致协议无效的情形，否则当事人应当履行调解协议。

二. 原告第三人的地位与权利

1. 原告第三人的定义：在诉讼中，除了原告和被告外，有时还会有第三人参与，他们可能与案件有一定的利害关系。
2. 权利限制：当原告第三人已经在调解协议上签字，意味着其已经认可了调解方案，通常就丧失了再次起诉的权利。
3. 特殊情况：但如果调解协议中明确保留了原告第三人的某些权利，或者调解协议本身存在重大瑕疵，原告第三人可能仍有权提起诉讼。

三. 结合本案分析

• 既然你和原告已经达成调解，并且原告第三人（即你的姐姐）也已经签字，那么除非调解协议存在无效或可撤销的情形，否则你姐姐一般不能再单独起诉。
• 如果调解协议确实存在问题，你姐姐可以寻求法律途径来撤销或变更协议，但这并不是简单的“再次起诉”，而是对已有协议的合法性或合理性提出挑战。

我建议：如果你姐姐对调解协议有异议，或者认为协议存在无效或可撤销的情形，应当及时咨询律师，通过法律途径来维护自己的权益。同时，也建议你与原告及姐姐进行充分沟通，了解彼此的诉求和担忧，以寻求更妥善的解决方案。如有进一步需要，您可以继续咨询我。