辞职通知书和辞职申请的主要区别体现在性质、法律效力以及用人单位的回应上。

1. 性质不同：

   • 辞职申请：是劳动者主动向用人单位提出辞去现有职位的请求。这一请求需要经过单位的审批，因此，辞职申请的最终结果由用人单位决定。
   • 辞职通知书：是劳动者正式向用人单位发出的离职声明，表示劳动者坚决要离开单位。此时，单位不能再用任何理由来阻挠或拖延劳动者的离职，这是法律规定的。

2. 法律效力不同：

   • 辞职申请在提交后，用人单位可以选择批准或不批准。如果不批准，双方需继续履行原来的劳动合同。
   • 辞职通知书则具有更强的法律效力。一旦劳动者提前三十日以书面形式通知用人单位（或在试用期内提前三日通知），即可解除劳动合同，无需用人单位的同意。

3. 用人单位的回应：

   • 对于辞职申请，用人单位需要明确回复是否批准。如果不及时批复，可能会影响劳动者的离职进程和后续就业。
   • 对于辞职通知书，用人单位无需回复批准与否，只需按照法律规定办理离职手续即可。

综上所述，辞职申请书和辞职通知书在性质、法律效力和用人单位的回应上存在明显区别。劳动者在提出离职时，应根据自己的实际情况和离职意愿选择合适的离职方式，并确保离职过程的合法性和顺畅性。如有任何疑问或需要进一步的法律帮助，请直接向我咨询。