支票上“第二手写不得转让”的标注位置及法律含义如下：

1. 标注位置
   根据《中华人民共和国票据法》及相关实务操作，支票上若需限制转让（即禁止背书转让），通常应在支票正面或背面的“背书栏”中明确记载“不得转让”字样。具体位置包括：

   • 正面记载：在支票正面“用途”栏或空白处手写“不得转让”，但需注意部分银行格式支票可能无此区域，需结合银行要求。
     
   • 背面记载：在支票背面“被背书人”栏上方或背书人签章处旁手写“不得转让”，此为更常见的操作方式，因背书栏本身用于记载转让信息，标注“不得转让”可直接限制后续背书行为。
     

2. 法律效果

   • 对出票人的影响：若出票人在支票上记载“不得转让”，则支票不得通过背书方式转让给第三人。若持票人违反规定转让，原票据权利人（如出票人、前手背书人）可主张转让无效，且出票人对受让人不承担票据责任。
     
   • 对背书人的影响：若背书人在背书时记载“不得转让”，则仅对该背书人与其直接后手之间的票据关系产生限制，即该背书人不对其后手的被背书人承担保证责任，但不影响支票其他部分的流通性。
     

3. 实务建议

   • 明确记载：为避免争议，建议使用银行提供的标准支票格式，并在背书栏中清晰手写“不得转让”字样，并由记载人签章确认。
     
   • 避免歧义：不得仅在支票边缘或非指定区域手写，否则可能被认定为无效记载，导致支票仍可正常转让。
     
   • 电子支票特殊规则：若使用电子支票系统，需通过系统内置的“不可转让”选项进行设置，手写条款可能不适用。
     

总结：支票上“第二手写不得转让”应记载于背书栏或正面指定区域，并需符合票据法形式要求，否则可能无法产生法律限制效果。如有具体操作疑问，可进一步向我说明支票类型及使用场景，我将提供更精准的指导。