“只能约定一次试用期”的含义，主要是根据《中华人民共和国劳动合同法》第十九条第二款的规定，即同一用人单位与同一劳动者在劳动关系中只能约定一次试用期。这一规定的核心目的在于保护劳动者的合法权益，避免用人单位通过重复约定试用期来变相延长对劳动者的考察期或降低劳动成本。
具体来说，这一规定包含以下几个要点：
唯一性：在劳动合同期限内，用人单位与劳动者之间只能就试用期达成一次约定。一旦试用期结束，无论劳动者是否转正，都不能再次约定试用期。
适用范围广泛：该规定适用于所有建立劳动关系的用人单位和劳动者，无论劳动合同期限长短、工作内容性质如何。无论是劳动合同续签时，还是劳动者离职一段时间后又重新签订劳动合同，原则上都不能再次约定试用期。
特殊情形下的处理：虽然法律规定了试用期的唯一性，但在某些特殊情况下，如劳动者离职一段时间后，原单位基于新的工作岗位需要，且该岗位替代性不强，新旧岗位的工作内容存在实质性变化的，是否可以再次约定试用期存在争议。然而，根据多数司法实践，为避免滥用试用期制度，通常也不支持重新约定试用期。
违法后果明确：如果用人单位违反规定，与劳动者多次约定试用期，将承担法律责任。例如，需按照已经履行的超过法定试用期的期间向劳动者支付赔偿金。
综上所述，“只能约定一次试用期”的规定是劳动合同法中的重要条款，旨在保障劳动者的合法权益，促进劳动关系的稳定，以及维护劳动力市场的秩序。如果用人单位在试用期的约定上存在任何疑问或争议，建议及时咨询专业律师，以确保合规用工，避免潜在的法律风险。