针对您提出的“有租房合同，分居两年起诉离婚是否可以一次判离”的问题，这并非一个简单的“是”或“否”的答案，而是需要综合考量多个法律因素和实际情况。
首先，从法律层面来看，《民法典》确实规定了因感情不和分居满两年，且调解无效的，应当准予离婚。这是判断夫妻感情确已破裂的一个重要法定情形。您提到的租房合同，可以作为证明分居事实的一个有力证据，但仅凭租房合同并不足以确保法院会一次判决离婚。
要实现一次判离，关键在于以下几点：
证据的充分性：除了租房合同，您还需要提供其他证据来证明夫妻双方是因感情不和而分居，并且分居已满两年。这些证据可能包括分居协议（如果有的话）、居委会或物业的证明、邻居的证人证言等。证据的充分性和可信度对于法院认定分居事实和性质至关重要。
感情确已破裂：即便满足了分居两年的条件，法院还会综合考量夫妻双方的感情是否真的已经破裂且无法挽回。如果在分居期间，夫妻双方仍有较多的联系、互动，或者一方坚决不同意离婚并表示愿意改善关系，法院可能会认为夫妻感情尚未彻底破裂，从而不判决离婚。
调解程序：在诉讼过程中，调解是必经程序。法院会尝试通过调解来化解夫妻之间的矛盾，促进和好。只有在调解无效的情况下，法院才会考虑判决准予离婚。
其他考量因素：法院还会综合考虑双方是否有和好的可能、是否存在过错方、子女抚养问题以及财产分割等其他实际情况。
因此，虽然您拥有租房合同作为分居的证据，但并不能保证法院会一次判决离婚。这取决于具体的法律程序、证据的充分性以及法院的综合判断。
建议：如果您正在面临这样的情况，我建议您咨询专业的律师。律师可以根据您的具体情况，提供更详细、个性化的法律建议和帮助，包括如何收集和提交证据、如何应对调解程序等，以确保您的权益得到充分保护。