若弟弟已去世，可通过以下两种方式做亲子鉴定，但需注意法律程序和证据效力问题：

1. 通过弟弟的遗物或生前物品提取DNA样本
   若弟弟生前留有牙刷、剃须刀、血痕、指甲、毛发（带毛囊）等生物样本，可联系司法鉴定机构提取DNA。但需注意：

   • 样本需未被污染（如避免与其他人混用物品）；
     
   • 需通过法院委托鉴定（个人私下鉴定结果可能不被法院采信）；
     
   • 若侄子未成年，需其法定监护人（如母亲）同意；若已成年，需其本人同意。

2. 通过诉讼程序申请司法鉴定
   若怀疑侄子非亲生，可向法院提起“否认亲子关系”之诉（需符合《民法典》第1073条条件），由法院委托鉴定机构进行鉴定。流程如下：

   • 起诉条件：需提供初步证据（如弟弟无生育能力证明、侄子出生时间异常等）；
     
   • 鉴定对象：若侄子未成年，需其母亲配合；若已成年，需其本人配合；
     
   • 结果效力：司法鉴定报告具有法律效力，可直接作为认定或否认亲子关系的依据。

关键提醒：

• 亲子鉴定涉及人身权利，必须遵循自愿原则（除涉及未成年人权益外）；
  
• 若侄子已成年且拒绝鉴定，法院可能无法强制，需通过其他证据（如时间线、血缘关系推定等）间接证明；
  
• 鉴定前建议咨询律师，确保程序合法，避免证据无效。
  

若有具体细节需进一步分析（如样本类型、诉讼策略等），可直接向我提问。