申请二次劳动能力鉴定一般不需要单位公章，但具体需结合实际情况和地方规定判断。以下是详细分析：

1. 从鉴定申请的主体和流程来看
   二次劳动能力鉴定（通常指对初次鉴定结论不服而申请的再次鉴定）的申请主体是劳动者本人或其近亲属、代理机构（如工会）。根据《工伤保险条例》第二十六条，申请再次鉴定只需提交书面申请、初次鉴定结论原件及复印件、相关病历资料等，并未明确要求单位公章。流程上，鉴定机构会直接受理劳动者或其代理人的申请，单位是否配合不影响程序启动。

2. 从单位参与鉴定的角色来看
   单位在劳动能力鉴定中更多是“配合义务方”而非“决定方”。例如，初次鉴定时单位需协助提供职工工伤认定决定、病历资料等，但二次鉴定是针对初次结论的复核，单位无权干预或要求加盖公章。若单位拒绝配合提供材料，劳动者可自行通过医疗档案、工伤认定书等证据完成申请。

3. 地方性规定或特殊情形的例外
   部分地区可能要求申请表需单位签署意见（如“同意申请”），但并非强制加盖公章。例如，若单位对初次鉴定结论有异议且主动申请二次鉴定，可能需在申请表上盖章确认；但劳动者个人申请时，通常只需签字确认即可。建议提前联系当地劳动能力鉴定委员会确认具体要求，避免因材料不全延误申请。

温馨提示：若单位以“未盖章”为由阻挠二次鉴定，劳动者可向劳动监察部门投诉或直接向鉴定委员会提交申请，同时保留好工伤认定书、初次鉴定结论等关键证据。如有复杂情况（如单位拒不配合、鉴定材料缺失等），可随时向我咨询具体应对方案。