父母已故的情况下，跟兄弟是能做亲子鉴定的，但具体情形和操作方式需根据实际情况来判断。以下是从不同角度对此问题的详细分析：
一、亲子鉴定的基本原理与适用范围
亲子鉴定是采用医学、遗传学等学科的理论和现代化DNA检测技术来判断有争议的父母与子女之间（特别是父子间）是否存在亲生血缘关系。虽然常用于检测父母与子女之间的血缘关系，但其适用范围并不仅限于此。当亲生父亲已经死亡无法进行亲子鉴定时，还可以通过同胞兄弟姐妹进行亲子鉴定进而确定血缘关系的存在。这种鉴定被称为半同胞血缘关系鉴定。
二、父母已故时与兄弟进行亲子鉴定的可行性
存在有效样本时：
- 如果父母遗体还未火化，可由死者监护人和被鉴定人共同办理鉴定委托，由专业鉴定机构前往殡仪馆采集死者样本（如耳后肌肉组织）进行鉴定。
- 如果父母已火化，但有遗留生物检材保存在公安部门或医院等相关单位且同意交付的，也可由死者监护人和被鉴定人共同办理鉴定委托，由专业鉴定机构前往样本存储地与保管单位交接样本进行鉴定。
通过兄弟进行半同胞血缘关系鉴定：
- 当亲生父亲已经死亡无法进行亲子鉴定时，同父异母或同父同母的兄弟姐妹之间可以通过半同胞血缘关系鉴定来确定彼此之间的血缘关系。
- 在进行该项亲子鉴定时，需要确定亡故父亲的身份信息和兄弟姐妹的身份信息，然后收集他们的DNA样本进行比对。DNA鉴定结果将作为法律依据，用于确认亲子关系的真实性。
三、申请进行半同胞血缘关系鉴定的原因与法律意义
- 继承纠纷：亲子关系的确认对于继承权的行使具有重要意义。如果兄弟姐妹能够通过亲子鉴定确认彼此之间的亲子关系，他们将有权按照法定继承顺序享有父母的继承权益。
- 法律保障：在司法实践中，亲子鉴定是一项常见的司法鉴定程序，其结果具有法律效力。法院会根据亲子鉴定的结果来确认亲子关系，保障相关当事人的合法权益。
四、对方不配合鉴定时的法律处理
- 根据法律规定，如果您方进行起诉请求确认亲子关系，并提供必要证据予以证明，另一方没有相反证据又拒绝做亲子鉴定的，人民法院可以认定确认亲子关系一方的主张成立。因此，在您有充分证据的情况下，不必担心对方不配合鉴定的问题。
五、实际操作建议
- 收集证据：在进行亲子鉴定前，尽量收集与亡故父母相关的身份信息、生物检材等证据，以便顺利进行鉴定。
- 选择专业机构：选择具有合法资质和丰富经验的专业鉴定机构进行亲子鉴定，以确保鉴定结果的准确性和法律效力。
- 咨询专业律师：在涉及继承纠纷等法律问题时，建议咨询专业律师以获取更全面的法律建议和帮助。
如有任何法律问题或需要进一步的法律建议，请直接向我咨询。我将根据您的具体情况提供专业的法律意见和帮助。