在债务纠纷中，是否可以一起起诉负债人的配偶，这主要取决于债务的性质是否为夫妻共同债务。以下是对此问题的详细解答：
一、夫妻共同债务的情形
共同签字或共同意思表示：
- 如果夫妻双方共同在借条、借款合同等债权凭证上签字，或者债务是基于夫妻双方共同意思表示所产生的，那么该债务被视为夫妻共同债务。在此情况下，债权人可以一并起诉夫妻双方。
用于家庭日常生活：
- 即使配偶一方没有在债权凭证上签字，但如果债务是用于家庭日常生活需要（如购买日常生活用品、支付子女教育费用、医疗费用等），根据相关司法解释，这也属于夫妻共同债务。债权人同样有权起诉配偶。
用于共同生产经营：
- 如果夫妻一方为了夫妻共同的生产经营活动而负债，且该生产经营活动的收益主要用于家庭共同生活的，该债务也被认定为夫妻共同债务。债权人可以起诉夫妻二人。
二、个人债务的情形
- 如果债务是夫妻一方在婚姻关系存续期间以个人名义超出家庭日常生活需要所负的，并且债权人不能证明该债务用于夫妻共同生活、共同生产经营或者基于夫妻双方共同意思表示的，那么该债务被视为个人债务。在这种情况下，债权人通常不可以起诉其配偶。
三、起诉前的准备
- 在准备起诉之前，债权人需要收集充分的证据来证明债务的性质。这包括但不限于借款合同、借条、转账记录、聊天记录等，以证明债务是否存在以及是否为夫妻共同债务。
- 如果不确定债务性质，建议咨询专业律师，以便更准确地判断是否可以起诉配偶。
四、实践中的操作建议
- 在实践中，当债权人面临债务纠纷时，应首先明确债务的性质，并结合具体案件事实和证据来判断。
- 避免盲目起诉配偶，以免引起不必要的法律纠纷和损失。如果确实需要起诉配偶，应确保有足够的证据支持自己的主张。
综上所述，在债务纠纷中是否可以一起起诉负债人的配偶，关键在于判断债务是否属于夫妻共同债务。这需要结合具体案件事实、证据以及相关法律法规进行综合分析和判断。