在高速公路上发生事故后，一般情况下是不可以重新定责的，但在特定条件下可以申请复核。以下是对这一问题的详细分析：
一、一般情况下的定责原则
在高速公路上发生交通事故后，交警部门会根据现场勘查、证人证言、监控录像等证据，依据《中华人民共和国道路交通安全法》及相关实施条例，对事故责任进行划分。这一划分结果通常具有权威性和终局性，一旦作出，即产生法律效力，各方当事人应当遵守。
二、特定条件下的复核申请
尽管定责结果一般具有终局性，但在某些特定条件下，当事人对事故责任认定有异议的，可以申请复核。这些条件主要包括：
对事故责任认定不服：当事人认为交警部门的事故责任认定存在错误或不当，如责任划分不公、事实认定不清等。
在规定期限内提出申请：根据《道路交通事故处理程序规定》，当事人对道路交通事故认定有异议的，可以自道路交通事故认定书送达之日起三日内，向上一级公安机关交通管理部门提出书面复核申请。
提供充分证据：申请复核时，当事人需要提供充分的证据来支持自己的观点，如新的证人证言、监控录像、现场照片等，以证明原事故责任认定存在错误。
三、复核申请的处理流程
受理与审查：上一级公安机关交通管理部门收到复核申请后，会进行受理与审查，核实申请材料的完整性和真实性。
复核结论：经审查认为原事故责任认定事实清楚、证据充分、适用法律正确、责任划分公正的，会维持原认定；认为原认定事实不清、证据不足、适用法律错误或责任划分不公的，会撤销原认定并责令重新作出认定。
重新认定：若原事故责任认定被撤销，交警部门会重新进行现场勘查、调查取证等工作，并依据新的证据和事实重新作出事故责任认定。
四、法律建议
及时申请复核：如果对事故责任认定有异议，务必在规定期限内提出复核申请，以免错过时机。
准备充分证据：申请复核时，要准备充分的证据来支持自己的观点，提高复核成功的几率。
遵守法律程序：在复核过程中，要遵守法律程序，配合交警部门的工作，不得干扰或阻碍复核工作的进行。
寻求专业帮助：如果对复核流程或法律条款有疑问，可以寻求专业律师的帮助，以确保自己的权益得到充分保障。
总结来说，虽然高速公路上发生事故后一般不可以重新定责，但在对事故责任认定有异议且符合复核条件的情况下，可以申请复核。如有任何疑问或需要进一步的法律帮助，请直接向我咨询。