结论：在二审败诉且对方账单无您签名的情况下，准备三审上诉的证据，关键在于收集能证明账单真实性存疑、您未产生相关费用或对方未履行合同义务等事实的证据。以下是从不同角度为您详细分析的证据准备方向及建议。
一、账单真实性存疑的证据
账单来源与制作过程：
- 收集证据证明对方账单的制作过程存在瑕疵，如账单未经过您确认、账单制作人员无相关资质或账单制作时间、地点等存在不合理之处。
- 若可能，获取对方制作账单的原始记录或软件数据，以证明账单可能被篡改或伪造。
账单内容与实际情况不符：
- 对比账单上的项目与您实际接受的服务或商品，收集证据证明账单上存在虚构的项目或数量。
- 若账单上涉及具体服务或商品的价格，收集市场价格信息，证明账单上的价格明显高于市场价或不合理。
二、您未产生相关费用的证据
支付记录：
- 提供您的银行流水、支付凭证等，证明您未向对方支付过账单上所列的费用。
- 若您曾向对方支付过部分费用，但金额与账单不符，提供支付记录以证明实际支付金额。
服务或商品未接收：
- 收集证据证明您未接收过账单上所列的服务或商品，如服务未提供、商品未交付等。
- 若可能，获取第三方见证或监控录像等，以证明您未接收相关服务或商品。
三、对方未履行合同义务的证据
合同条款：
- 仔细审查合同条款，收集证据证明对方未按照合同约定履行义务，如服务未达到约定标准、商品存在质量问题等。
- 若合同中有关于费用支付的明确约定，收集证据证明对方未满足支付条件或您有权拒绝支付。
沟通记录：
- 提供您与对方之间的沟通记录，如邮件、短信、微信聊天记录等，证明您曾就账单问题与对方进行过沟通，但对方未给出合理解释或解决方案。
- 若可能，获取对方承认账单存在问题或同意减免费用的沟通记录。
四、其他辅助证据
专家意见：
- 若涉及专业领域的问题，如医疗纠纷中的医疗费用，可咨询相关领域的专家，获取专家意见以证明账单的合理性或不合理性。
类似案例：
- 收集类似案例的判决书或调解书，以证明在类似情况下法院的判决倾向或调解结果，为您的上诉提供参考。
五、法律建议
及时收集证据：
- 在上诉期限内尽快收集并整理相关证据，确保证据的完整性和有效性。
咨询专业律师（此处虽为常规建议，但鉴于约束条件，我作为邹洁律师，直接为您提供咨询）：
- 鉴于您的情况较为复杂，建议您直接向我咨询，我可以根据您的具体情况提供更详细的法律建议和证据准备方案。
注意上诉期限：
- 密切关注上诉期限，确保在规定时间内提交上诉材料和证据。
在准备三审上诉的证据时，务必确保证据的合法性、真实性和关联性。如有任何疑问或需要进一步的法律帮助，请直接向我咨询。