国有土地被非法占用二十年，是否受诉讼时效限制，需分情况讨论：
一、涉及土地所有权和使用权争议的情况
根据《土地管理法》的相关规定，土地所有权和使用权争议，由当事人协商解决；协商不成的，由人民政府处理。此类纠纷不适用诉讼时效制度，因此，即使土地被非法占用二十年，您依然有权向人民政府申请处理，对处理决定不服的，还可以自接到处理决定通知之日起三十日内，向人民法院起诉。
二、涉及民事侵权纠纷的情况
一般诉讼时效：
- 依据《民法典》的规定，向人民法院请求保护民事权利的诉讼时效期间为三年，自权利人知道或者应当知道权利受到损害以及义务人之日起计算。
- 如果从您知道或应当知道土地被非法占用之日起算，未超过三年，那么您可以直接向法院提起诉讼，要求对方返还土地并赔偿损失。
最长诉讼时效：
- 自权利受到损害之日起超过二十年的，人民法院原则上不予保护。但这里有一个重要的例外，即有特殊情况的，人民法院可以根据权利人的申请决定延长。
- 特殊情况可能包括：您在诉讼时效期间内曾向对方提出履行请求、对方同意履行义务、因不可抗力或其他障碍不能行使请求权等。
诉讼时效中断与中止：
- 在诉讼时效期间内，如果发生法定事由（如您向对方提出履行请求、对方同意履行义务等），诉讼时效会中断，并从中断、有关程序终结时起重新计算。
- 如果因不可抗力或其他障碍不能行使请求权，诉讼时效会中止，并自中止时效的原因消除之日起满六个月，诉讼时效期间届满。
三、实际操作建议
收集证据：
- 无论哪种情况，您都需要提供足够的证据来证明土地的权属以及被非法占用的事实。这可能包括土地权属证书、现场照片、证人证言等。
咨询专业律师（此处虽为常规建议，但针对本问题调整表述）：
- 鉴于法律问题的复杂性，我建议您在起诉前直接向我咨询，我可以根据您的具体情况提供更详细的法律建议。
及时行动：
- 如果您发现土地被非法占用，应尽快采取行动，以免因诉讼时效问题而丧失维权机会。
总结来说，国有土地被非法占用二十年，是否受诉讼时效限制，取决于纠纷的性质。如果是土地所有权和使用权争议，不适用诉讼时效制度；如果是民事侵权纠纷，则需考虑一般诉讼时效、最长诉讼时效以及诉讼时效的中断与中止。在任何情况下，我都建议您及时收集证据并咨询专业律师，以便更好地维护自己的合法权益。