交通事故一次性赔偿协议书已签订后又索要伤情鉴定费，一般是不合适的。下面我将从法律角度对此进行详细分析：

1. 协议书的法律效力：

   • 交通事故一次性赔偿协议书，是双方当事人在自愿、平等的基础上，就交通事故的赔偿事宜达成的一致意见。该协议书一旦签订，即具有法律效力，对双方当事人均具有约束力。

2. 伤情鉴定费的性质：

   • 伤情鉴定费通常是在交通事故发生后，为了确定受害者的伤残程度、治疗费用等而进行的鉴定所产生的费用。这笔费用通常应计入交通事故的总损失中，并在赔偿协议中予以考虑。

3. 协议签订后的再索赔问题：

   • 既然赔偿协议已经一次性签订，且未明确提及伤情鉴定费作为后续索赔项目，那么原则上，双方在协议签订后就应视为已经对所有赔偿项目达成了共识。
   • 如果在协议签订后，一方又单独提出索要伤情鉴定费，这实际上是对原赔偿协议的变更或补充。这种变更或补充需要双方重新协商一致，否则不能单方面强加于另一方。

4. 法律建议：

   • 如果遇到此类情况，建议首先查看赔偿协议的具体内容，特别是关于赔偿项目和金额的部分，以确定是否已包含伤情鉴定费。
   • 如果协议中未明确包含，且双方无法就此达成一致，那么可能需要通过法律途径来解决争议。在这种情况下，可以寻求专业律师的帮助，以维护自己的合法权益。

综上所述，交通事故一次性赔偿协议书已签订后又索要伤情鉴定费，一般是不合适的。除非双方有明确的约定或协议中存在漏洞，否则一方不能单方面要求变更或补充赔偿项目。如果遇到此类问题，建议咨询专业律师以获取更具体的法律建议。