结论：保险公司签和解协议书后，二次手术能否赔付需分情况讨论，具体如下：

1. 和解协议已明确涵盖二次手术费用
   若和解协议中明确约定了“包括后续治疗费（含二次手术）”或类似条款，且双方签字确认，则保险公司需按协议履行赔付义务。此时，二次手术费用属于协议范围内的赔偿项目，保险公司无权拒绝。
   法律依据：根据《民法典》第465条，依法成立的合同对当事人具有法律约束力，双方应按约定履行义务。

2. 和解协议未明确约定二次手术费用
   若协议仅针对当前已发生的医疗费用或未提及后续治疗，则需进一步分析：

   • 若二次手术与首次事故直接相关（如因首次手术未彻底治愈、并发症等），且属于必要治疗，可主张保险公司赔付。但需提供医疗证明、费用清单等证据，证明手术必要性及费用合理性。
     
   • 若二次手术与首次事故无关（如因自身疾病、新事故等），则保险公司通常不承担赔付责任。
     法律依据：根据《保险法》第22条，保险事故发生后，投保人需提供与确认保险事故性质、原因、损失程度等有关的证明和资料。

3. 和解协议存在重大误解或显失公平
   若签订协议时，您对二次手术的必要性或费用存在重大误解（如医生未告知需二次手术），或协议赔偿金额明显低于实际损失，可依据《民法典》第147条、第151条，在法定期限内申请撤销或变更协议，重新主张赔付。

建议：

• 立即查阅和解协议条款，确认是否包含二次手术相关约定；
  
• 收集二次手术的医疗记录、费用单据等证据；
  
• 若协商无果，可向法院起诉或申请仲裁（依协议约定），主张赔付。
  

如有进一步疑问，可直接向我咨询，我会结合具体协议内容为您详细分析。