货物被使用后影响二次销售，是否可以拒绝退货申请，这个问题并非绝对，而是需要根据具体情况和法律法规来决定。以下是对此问题的详细分析：

1. 七天无理由退货的限制：

   • 根据《中华人民共和国消费者权益保护法》第二十五条，消费者通过网络、电视、电话、邮购等方式购买的商品，在收到商品之日起七日内有权无理由退货。
   • 但这一权利的前提是退货的商品应当完好，不影响二次销售。如果商品因使用、损坏或污染等影响二次销售，商家有权拒绝退货申请。

2. 商品质量问题的例外：

   • 如果货物本身存在质量问题，不符合质量要求，那么消费者可以不受商品是否影响二次销售的限制，要求退货、更换或修理。
   • 在这种情况下，即便商品已被使用并影响二次销售，消费者的退货请求仍应得到支持。

3. 商家过错的情况：

   • 如果商家存在欺诈行为，如虚假宣传、以次充好等，那么消费者即使已使用商品并影响其二次销售，也有权主张退货退款。

4. 与商家的约定：

   • 如果消费者和商家在购买前对退货条件有明确约定，如商家明确表示商品一经拆封即不能退货，并且消费者在知晓此情况下仍然购买，那么消费者应受该约定约束。

综上所述，货物被使用后影响二次销售是否可以拒绝退货申请，取决于多个因素。如果商品符合七天无理由退货条件但已影响二次销售，商家可能拒绝退货；但如果商品存在质量问题或商家有过错，消费者仍有权要求退货。因此，在处理此类问题时，建议商家和消费者根据具体情况进行协商，并参考相关法律法规来做出决定。如果您有具体的法律问题或需要进一步的帮助，请直接向我咨询。