老婆跟别人生孩子，第三者要求亲子鉴定，这种情况下是否可以进行亲子鉴定，主要取决于相关当事人的意愿和法律规定。

首先，从法律角度来看，亲子鉴定涉及个人隐私和家庭关系，需要谨慎处理。如果第三者提出亲子鉴定的要求，而你的妻子和疑似父亲均同意进行鉴定，那么在不违反法律规定的前提下，可以进行亲子鉴定。但需要注意的是，亲子鉴定的结果可能对家庭关系产生重大影响，因此在进行鉴定前，各方应充分考虑并协商好后续的处理方式。

其次，如果只有第三者单方面要求亲子鉴定，而你的妻子或疑似父亲不同意，那么在没有法律依据或法院裁决的情况下，通常不能强制进行亲子鉴定。因为亲子鉴定需要当事人的自愿配合，否则可能侵犯当事人的隐私权或其他合法权益。

此外，还需要考虑亲子鉴定可能带来的法律后果。如果亲子鉴定结果证实孩子与第三者存在亲子关系，那么这可能涉及到抚养权、继承权等法律问题的处理。因此，在进行亲子鉴定前，各方应充分了解相关法律规定，并咨询专业律师的意见。

综上所述，是否可以进行亲子鉴定取决于相关当事人的意愿和法律规定。在进行亲子鉴定前，各方应充分协商并了解相关法律规定，以避免可能的法律纠纷和不良后果。 如果你有进一步的法律问题或需要更详细的法律建议，可以直接向我咨询。